王穆之起初是琅琊王司马丕的王妃，晋哀帝司马丕即位为皇帝后，王穆之于升平五年九月戊申（361年10月29日）被册立为皇后，并追赠王穆之父亲王濛为金紫光禄大夫，追封晋安县侯，母亲爰氏为安国乡君。
王穆之成为皇后三年，没有儿子，兴宁三年春正月庚申（365年2月22日）去世，谥号靖。兴宁三年三月壬申（365年5月5日），晋哀帝和王穆之合葬于安平陵。
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