早年在杭州养正书塾读书。

1901年，去上海办报，后在杭州、江山、广州等地任教，并参加柳亚子的革命文学团体“南社”。

1911年夏，赴日本留学，加入中国同盟会。辛亥革命后，任浙江都督府秘书，上海《大共和日报》主编。

1917年，任北京大学教授。

五四运动时，被推为北京大学教职员会书记、北京大中学校教职员会联合会主席。

1921年，任浙江省第一师范学校校长。

1922年，任浙江省教育厅厅长，不久两次出任北洋政府教育部次长。

1926年，遭段祺瑞通缉而回杭州。

1927年，任浙江省政务委员兼民政厅长。

1928年，任国民政府教育部次长。

1930年，回北大任教。

1935年华北事变后，与杨秀峰、许德珩等发起组织北平文化界抗日救国会，任主席。抗日战争期间隐居上海。

1945年12月，参与发起成立中国民主促进会，被选为常务理事。

1946年5月，任上海人民团体联合会常务理事。同年6月被上海各界群众推为上海人民赴南京和平请愿代表团团长，在南京下关车站被国民党特务打伤。

1947年底，赴香港，从事民主活动。

1948年，由香港进入东北解放区。

1949年9月，出席中国人民政治协商会议第一届全体会议。

中华人民共和国成立后，先后任中央人民政府委员，政务院政务委员、文化教育委员会副主任，教育部、高等教育部部长，中国文字改革研究委员会主任，中国科学院学部委员。

1964年12月至1970年，任政协全国委员会副主席。

马叙伦是第一、二届全国人民代表大会常务委员会委员；政协第一、二、三届全国委员会常务委员；中国民主同盟第二、三届中央副主席；民进第一、二届中央常务理事，第三、四、五届中央主席。马叙伦年久失修的马叙伦车家弄祖居1956年周恩来、马叙伦等在中南海马叙伦在中国人民政治协商会议作大会发言马叙伦马叙伦与毛泽东在一起用餐马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法马叙伦书法