任职河南
永和六年（141年），梁商去世，汉顺帝拜侍中梁不疑为河南尹。
封侯食邑
建和元年（147年）秋，因梁冀立桓帝刘志有功，梁冀增封食邑一万三千户，梁不疑被封为颍阳侯，食邑万户。
得罪梁冀
元嘉元年（151年），梁不疑举荐的尚书张陵呵斥带剑入宫的梁冀，并让禁军夺走梁冀的剑，罚梁冀一年的俸禄。梁冀便忌恨梁不疑，于是梁冀让中常侍在汉桓帝面前进谗言，将梁不疑转任为光禄勋，并让自己儿子梁胤接任河南尹之职。
辞官归隐
梁不疑自知兄弟不睦，于是便辞让职位，回到宅第，与弟弟梁蒙闭门自守。
然而梁冀不想让梁不疑与宾客们来往，便暗中让人化装来到梁不疑的门前，记录与梁不疑往来的人。南郡太守马融、江夏太守田明，刚上任，顺道前往谒见梁不疑，梁冀便让州郡长官用其他的事情陷害二人，于是二人借呗髡笞(剃去须发，鞭打身体)，流放朔方。马融自杀，田明死在流放的路上。
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